สรุปและคำอธิบายการทดสอบ
อวัยวะภายใน leishmaniasis หรือ Kala-azar เป็นโรคติดต่อที่เกิดจากเชื้อ L. donovani หลายสายพันธุ์ย่อยโรคนี้ประเมินโดยองค์การอนามัยโลก (WHO) ว่าจะส่งผลกระทบต่อผู้คนประมาณ 12 ล้านคนใน 88 ประเทศมันติดต่อไปยังมนุษย์โดยการกัดของ Phlebotomus sandflies ซึ่งได้รับเชื้อจากการกินสัตว์ที่ติดเชื้อแม้ว่าจะเป็นโรคที่พบในประเทศยากจน แต่ในยุโรปตอนใต้ โรคนี้ได้กลายเป็นโรคฉวยโอกาสที่สำคัญในผู้ป่วยโรคเอดส์การระบุสิ่งมีชีวิต L. donovani จากเลือด ไขกระดูก ตับ ต่อมน้ำเหลือง หรือม้าม ให้แนวทางการวินิจฉัยที่แน่นอนการตรวจทางเซรุ่มวิทยาของ anti-L.พบว่า donovani IgM เป็นเครื่องหมายที่ดีเยี่ยมสำหรับโรคลิชมาเนียในอวัยวะภายในเฉียบพลันการทดสอบที่ใช้ในคลินิกรวมถึง ELISA, fluorescent antibody หรือการทดสอบการเกาะติดกันโดยตรง 4-5เมื่อเร็ว ๆ นี้ การใช้โปรตีนจำเพาะของ L. donovani ในการทดสอบได้ปรับปรุงความไวและความจำเพาะอย่างมาก
Leishmania IgG/IgM Combo Rapid Test เป็นการทดสอบทางซีรั่มวิทยาโดยใช้โปรตีนรีคอมบิแนนต์ ซึ่งจะตรวจหาแอนติบอดี IgG และ IgM ต่อ L. Donovani พร้อมกันการทดสอบให้ผลที่เชื่อถือได้ภายใน 15 นาทีโดยไม่ต้องใช้เครื่องมือใดๆ
หลักการ
การทดสอบอย่างรวดเร็วของ Leishmania IgG/IgM เป็นการตรวจทางอิมมูโนแอสเซย์ทางโครมาโตกราฟีแบบไหลด้านข้างตลับทดสอบประกอบด้วย: 1) แผ่นคอนจูเกตสีเบอร์กันดีที่มีแอนติเจน L. donovani ชนิดรีคอมบิแนนท์ที่เชื่อมกับคอลลอยด์โกลด์ (คอนจูเกต Leishmania) และคอนจูเกต IgG-gold ของกระต่าย 2) แถบเยื่อหุ้มไนโตรเซลลูโลสที่มีแถบทดสอบสองแถบ (แถบ T1 และ T2) และแถบควบคุม (C band)แถบ T1 เคลือบไว้ล่วงหน้าด้วย monoclonal anti-human IgM สำหรับการตรวจจับ anti-Lแถบโดโนวานี IgM, T2 ถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยสารรีเอเจนต์สำหรับตรวจหาสารต้าน Ldonovani IgG และ C band ถูกเคลือบไว้ล่วงหน้าด้วย IgG ที่ต่อต้านกระต่ายจากแพะ
เมื่อมีการจ่ายตัวอย่างทดสอบในปริมาณที่เพียงพอลงในหลุมตัวอย่างของกลักกระดาษ ชิ้นงานจะเคลื่อนผ่านโดยการทำงานของเส้นเลือดฝอยผ่านกลักกระดาษL. donovani IgM หากมีอยู่ในตัวอย่างจะจับกับคอนจูเกตของ Leishmaniaจากนั้น อิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับบนเมมเบรนโดยแอนติบอดีต่อต้าน IgM ของมนุษย์ที่เคลือบไว้ล่วงหน้า เกิดเป็นแถบ T1 สีเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ผลการทดสอบในเชิงบวกของ L. donovani IgML. donovani IgG หากมีอยู่ในตัวอย่างจะจับกับคอนจูเกตของ Leishmaniaจากนั้น อิมมูโนคอมเพล็กซ์จะถูกจับโดยรีเอเจนต์ที่เคลือบไว้ล่วงหน้าบนเมมเบรน เกิดเป็นแถบ T2 สีเบอร์กันดี ซึ่งบ่งชี้ผลการทดสอบ L. donovani IgG เป็นบวก
การไม่มีแถบ T ใดๆ (T1 และ T2) แสดงว่าเป็นผลลบการทดสอบประกอบด้วยการควบคุมภายใน (แถบ C) ซึ่งควรแสดงแถบสีเบอร์กันดีของอิมมูโนคอมเพล็กซ์ของคอนจูเกตต่อต้านกระต่าย IgG/กระต่าย IgG-ทองของแพะ โดยไม่คำนึงถึงการพัฒนาสีบนแถบ T ใดๆมิฉะนั้นผลการทดสอบจะไม่ถูกต้องและต้องทดสอบชิ้นงานทดสอบซ้ำกับอุปกรณ์อื่น
